与各种基相对应的复合豆种子毛皮特异性多氧化酶 (PPO) 的生物化学分析

科学领域:

• 生物化学
• 植物科学
• 酵素学

背景情况:

• 种子外通过机械和化学防御为胚胎提供了至关重要的保护.
• 种子外层中的化合物是多氧化酶 (PPO) 的基质,导致寡合体的形成.

研究的目的:

• 为了异质地表达和生化表征野生豆聚氧化酶 (PeaPPO).
• 研究PeaPPO的酶活性和基质特异性.
• 分析PPO对豆类基因型的性特征的影响.

主要方法:

• 野生豆PPO蛋白 (Pisum elatius) 的异构表达
• 生物化学测试以确定最佳pH值,辅因子要求 (SDS) 和抑制剂.
• 使用各种化合物的基质特异性的分析.
• 主要成分分析 (PCA) 的LC-MS/MS形状,以比较PPO+和PPO-基因型.

主要成果:

• 再组合PeaPPO需要二硫酸盐 (SDS) 来激活,并且在pH值6. 0时发挥最佳作用.
• 已确定特罗波龙和图贾普利是PeaPPO的强效抑制剂.
• PeaPPO对醇,甲基醇和醇表现出活性,对甲基醇有偏好.
• 在PPO+和PPO-基因型之间观察到PPO基质和抑制剂积累的显著差异.

结论:

• PeaPPO表现出单酶和甲基醇氧化酶的活动,将其归类为甲基酸酶.
• 这种酶在修改种子外代谢物中起作用.
• 在PPO的基因变异影响豆种子的成分.