使用新型实时RT-qPCR方法同时检测双贝类中的HEV,HAstV和SaV
Yan Wang1,2, Jinfeng Wang2, Yujing Li3
1Hebei Key Laboratory of Environment and Human Health, School of Public Health, Hebei Medical University, No. 361, Zhongshan East Road, Shijiazhuang, 050017, China.
Food and environmental virology
|August 21, 2025
概括
一种新的实时RT-qPCR方法可以快速同时检测乙型肝炎病毒 (HEV),人类天体病毒 (HAstV) 和两贝类中的沙波病毒 (SaV). 这种进步有助于识别食品传染病原体并确保食品安全.
科学领域:
- 检测食物传播病原体
- 分子诊断
- 公共卫生微生物学
背景情况:
- 肝炎E病毒 (HEV),人类天体病毒 (HAstV) 和病毒 (SaV) 是导致食物传播疾病爆发的重要原因.
- 准确和快速的检测方法对于监测和控制食品中的这些病毒病原体至关重要.
- 现有的检测方法可能无法同时识别多种食物传播病毒.
研究的目的:
- 开发和验证一种快速,灵敏的实时四重光定量PCR (RT-qPCR) 试验.
- 为了同时检测食品表格中的HEV,HAstV和SaV,特别是双贝类.
- 在河北省的双贝类样本中评估这些病毒的流行程度.
主要方法:
- 开发一个四重实时RT-qPCR测定,将MS2菌体作为过程控制.
- 使用蛋白酶K-PEG 8000沉-法优化实验参数和核酸提取.
- 对354个双贝类样本进行测试,并对样本子集进行单次RT-qPCR的比较.
主要成果:
- 四次RT-qPCR显示出高灵敏度,检测极限为HEV,HAstV,MS2RNA的10^3副本/μL,而SaV的10^2副本/μL.
- 证实了极佳的可重现性,在方法内和方法间的变化系数低于3. 0%,总检测时间低于90分钟.
- 在354个双贝类样本中,HEV的阳性率为9. 60%,HAstV为3. 67%,SAV为6. 78%,检测到各种混合感染. 四次测定显示高一致性 (总体为98. 67%) 与单次测定.
结论:
- 开发的四重实时RT-qPCR方法为同时查HEV,HAstV和SaV提供了快速和灵敏的工具.
- 这种方法有效检测双贝类中的食物传播病毒,有助于加强食品安全监测.
- 该测试的效率和准确性支持其在食品传播病原体的常规监测计划中的应用.
