树脂支持的特定位点抗体结合方法导致抗体与药物结合物保持有效性和改善稳定性

科学领域:

• 生物结合化学
• 抗体工程
• 药物输送系统

背景情况:

• 传统的抗体 - 药物结合物 (ADC) 往往表现出异质性,这是由于内源性半氨酸残留物的随机结合.
• 特定部位的结合旨在改善ADC的同质性和治疗特征.
• 之前的Q295化方法需要一个具有挑战性的还原/再氧化步骤.

研究的目的:

• 优化特定抗体与药物联合体 (ADC) 的生成,其药物与抗体的比率为2.
• 开发一种强大的高吞吐量Q295化方法,避免有问题的还原/再氧化步骤.
• 与随机结合物相比,评估Q295结合ADC的生物物理和生物特性.

主要方法:

• 在Q295残留物中对非工程IgG1抗体的特定部位的分离.
• 在Q297使用PNGase F去除固体阻碍的抗体脱糖化.
• 在Q295中使用微生物转谷氨酶 (mTGase) 引入一种含有醇的分子 (半胺).
• 在树脂支架上使用单硫三 (TPPMS) 优化选择性减少工程二硫化物,避免全局减少/再氧化.

主要成果:

• 建立了一种优化,树脂支持的Q295化方法,适合高吞吐量合成.
• 这种新方法成功地产生了2个DAR的特定站点的ADC,从而消除了减少/重新氧化的需要.
• 与随机的ADC相比,Q295结合的tubulysinADC表现出有利的生物物理和生物特性.

结论:

• 优化的Q295化方法提供了一个强大的平台,用于生成同质的,特定位点的抗体-药物联合体.
• 这种方法比传统的随机结合具有显著的优势,导致ADC性能得到改善.
• 开发的方法有助于创建具有增强治疗潜力的下一代ADC.