一个基于光酶的快速和强大的报告系统来评估SARS-CoV-2蛋白酶活性

科学领域:

• 病毒学
• 生物化学
• 药物发现

背景情况:

• 有效的SARS-CoV-2抗病毒药物至关重要,但病毒进化需要新的治疗策略.
• 针对病毒蛋白酶,如主要蛋白酶 (Mpro),是抗病毒开发的关键方法.

研究的目的:

• 为评估SARS-CoV-2 Mpro活动开发基于发光的敏感和快速报告系统.
• 验证报告系统在识别Mpro抑制剂和预测抗病毒活性方面的有效性.

主要方法:

• 一种新型的记者系统,i-NSP4/5-Gluc2,使用与Mpro分裂部位的亲介素1β片段合并的Gaussia luciferase (Gluc) 来设计.
• 该系统测量了在M-介导裂变时分泌的Gluc发光.
• 该试验以灵敏度和特异性进行优化,并使用Nirmatrelvir进行验证,并用于选化合物库.

主要成果:

• 在检测Mpro活性方面,i-NSP4/5-Gluc2系统表现出高灵敏度和特异性.
• 该试验成功地从46种化合物的库中确定了潜在的Mpro抑制剂.
• 在14种新发现的化合物中,有13种对活体SARS-CoV-2具有强烈的抗病毒活性.

结论:

• i-NSP4/5-Gluc2系统是用于快速查SARS-CoV-2 Mpro抑制剂的经过验证的高通量工具.
• 这项测试加速了针对SARS-CoV-2和潜在的未来病毒威胁的有效抗病毒化合物的发现.
• 该系统的预测能力有助于开发新型病毒流行病治疗方法.