使用高分辨率质谱测试对类药物中的凝结杂质进行绝对量化:葡萄糖在药物开发中的案例研究
Anusha Kodidasu1, Koushik Acharyya1, Vasanthakumar Ganga Ramu1
1Peptides and Complex API's R&D Center, Alembic Pharmaceuticals Ltd., #2700, Neovantage, Genome Valley, Hyderabad, Telangana 500078, India.
Journal of the American Society for Mass Spectrometry
|August 26, 2025
概括
开发精确的杂分析方法至关重要. 这项研究验证了两种UPLC-HRMS量化策略,用于检测合成葡萄糖中的低丰度凝结杂质,伪MRM提供了更好的性能.
科学领域:
- 分析化学
- 制药科学
- 生物技术
背景情况:
- 合成类药物提供量身定制的治疗方法,但在污染物管理方面面临挑战.
- 像RP-HPLC这样的传统方法难以分离低丰度,凝结性杂物.
- 液体染色学高分辨率质谱 (LC-HRMS) 对于鉴定是有效的,但在量化方面是有限的.
研究的目的:
- 开发和验证两种超高性能液体染色学-高分辨率质谱 (UPLC-HRMS) 量化策略.
- 在合成葡萄糖中精确量化两个结构相似的凝结杂质 (des-Gly4葡萄糖和des-Thr5葡萄糖).
- 为了比较全扫描和伪多重反应监测 (p-MRM) 模式的杂质量测量性能.
主要方法:
- 使用全扫描和p-MRM模式开发和验证UPLC-HRMS方法.
- 在合成葡萄糖中量化des-Gly4葡萄糖和des-Thr5葡萄糖杂质.
- 评估方法的特异性,线性,LOD,LOQ,精度和回收.
主要成果:
- 这两种方法在0.25-25μg/ml范围内显示出高特异性和良好的线性 (R2>0.99).
- 达到0.01%的低检测极限 (LOD) 和0.02%的量化极限 (LOQ).
- 观察到可比的准确度,精度 (<10% RSD) 和恢复率 (100-120%); p-MRM显示略有更好的线性和灵敏度.
结论:
- 经过验证的UPLC-HRMS方法可以准确量化合成葡萄糖中的关键杂物.
- 全扫描和p-MRM模式都适用于杂质量测量,p-MRM具有潜在的优势.
- 这些方法解决了合成药物开发中的杂质管理挑战.
