用于快速检测Glaesserella parasuis的光和侧流滴剂重组辅助放大器的开发和应用

科学领域:

• 兽医微生物学
• 分子诊断
• 细菌学

背景情况:

• 在断奶的小猪中,Glaesserella parasuis (G. parasuis) 引起严重的呼吸系统疾病和死亡.
• 有效控制Glässer的疾病依赖于准确和快速的G.parasuis检测.
• 目前的检测方法可能缺乏及时干预所需的速度或可访问性.

研究的目的:

• 开发和评估两种基于重组酶辅助放大 (RAA) 的新诊断技术,用于G. parasuis.
• 为了比较开发的测试的灵敏度,特异性和实际适用性.
• 在实验室和实地环境中提供G. parasuis的快速和准确的诊断工具.

主要方法:

• 开发两种不同的RAA测量方法:光RAA (Fluo-RAA) 和侧流量测量RAA (LFD-RAA).
• 使用煮熟的鼻水样本作为DNA模板, 绕过了大量DNA提取的需要.
• 评估了测试灵敏度,检测到G. parasuisDNA的10个副本 (Fluo-RAA) 和100个副本 (LFD-RAA).

主要成果:

• 在Fluo-RAA和LFD-RAA测试中,G. parasuis检测的特异性很高.
• 流体RAA的灵敏度为10个DNA拷贝,而LFD-RAA检测到100个DNA拷贝.
• 使用煮熟的鼻子拭子进行的测试显示,其灵敏度与商业DNA提取套件相美.
• 提供更高的灵敏度但需要更多的劳动和实验室条件.
• 由于LFD-RAA在一小时内提供了结果,不需要专门的设备,因此非常适合现场应用.

结论:

• 为检测G.parasuis开发了敏感和特定的RAA测定.
• 在实验室诊断中,Fluo-RAA是一种敏感的选择.
• LFD-RAA提供了一个快速的,无需设备的,可在现场部署的G. parasuis检测解决方案.
• 这些测试可以帮助及时诊断和控制猪群中的格莱瑟病.