使用高通量分析量化和介质组件,对单克隆抗体中基含量的细胞培养影响的解析

科学领域:

• 生物化学
• 生物制药制造业
• 分析化学

背景情况:

• 基 (Hyl) 是素的翻译后修饰物.
• 高水平的Hyl可以被视为需要调查的产品质量属性 (PQA).
• 使用完整质量分析和映射进行了初始的Hyl检测.

研究的目的:

• 在单克隆抗体 (mAb) 生产过程中检查和控制氧化 (Hyl) 的升高水平.
• 在上游加工中确定高Hyl水平的根本原因.
• 开发和实施强大的分析和流程策略来缓解Hyl.

主要方法:

• 完整的质量分析和映射用于初始的Hyl检测.
• 对分析方法的修订,从三位式转变为IdeS消化,以准确量化Hyl.
• 上游过程优化涉及介质组成 (介质A与介质B) 和Fe (III) 补充.

主要成果:

• 基因含量最初在A介质中为20% - 35%,因此需要进行根本原因调查.
• 试验性映射低估了Hyl水平的约10倍.
• 通过IdeS消化提供了准确的量化;介质B将Hyl降低到10%-15%.
• 介质中的Fe (III) 度增加显著降低了Hyl度.
• 在500L生物反应器扩展期间,补充铁证明是一种强大的缓解策略.

结论:

• 氧化的升高是mAb生产中的关键PQA,可以有效地管理.
• 与三位式测绘相比,IdeS-消化是精确量化Hyl的优越分析方法.
• (III) 补充是一种可行的和可扩展的策略,用于控制上游生物处理中的Hyl水平.