开发一种简洁,快速的基于细胞的功能测试来评估人类的Dectin-1抗剂

科学领域:

• 免疫学
• 细胞生物学
• 药理学

背景情况:

• 德-1 是一种对抗真菌免疫,炎症和癌症至关重要的C型乳素受体.
• 目前对抗剂的评估依赖于结合测定,这可能不反映功能抑制.
• 需要对人类Dectin-1 (hDectin-1) 抗剂进行快速,功能性,基于细胞的测定.

研究的目的:

• 开发和验证基于细胞的hDectin-1抗剂的快速测定方法.
• 与结合测试相比,提供一种更准确的评估Dectin-1抗剂疗效的方法.

主要方法:

• 使用稳定表达hDectin-1的THP-1细胞 (dTHP-1细胞).
• 激活的hDectin-1与耗尽的Zymosan (dZymosan) 诱导TNF-α的产生.
• 优化测定条件为10微克/毫升dZymosan4小时.
• 测试了拉米纳林和德克斯特兰T40的抑制作用.

主要成果:

• 该试验成功测量了dTHP-1细胞中dZymosan诱导的TNF-α产生.
• 拉米纳林对TNF-α产生有剂量依赖的抑制,证实了Dectin- 1的作用.
• 德克斯特兰T40没有抑制作用,表明了测试特异性.
• 测试简短,在4小时内完成.

结论:

• 一个新的,快速 (4小时),功能性的,基于细胞的hDectin-1抗剂测定已经建立.
• 这种测试直接测量了Dectin-1信号的生理结果,超过了结合测试.
• 开发的平台对查和表征hDectin-1抗剂有价值,有助于对Dectin-1相关疾病的治疗开发.