结合深度突变扫描和SPR绑定方法,进行大规模的抗素抗体鉴定
Ophélie Kot1, Lois Lequesne2, Hans Werner Mages3
1Département Médicaments et Technologies pour la Santé (DMTS), SIMoS, Université Paris Saclay, CEA, INRAE, Gif-sur-Yvette, France.
mAbs
|August 29, 2025
概括
开发有效的子抗毒素需要针对特定的表位素进行中和. 这项研究特征了17种抗素抗体,揭示了强效中和交叉反应的关键表位,有助于设计更好的素治疗方法.
科学领域:
- 生物化学
- 免疫学
- 毒理学
背景情况:
- 豆中含有的有毒莱素构成了生物恐怖主义威胁.
- 使用抗体的被动免疫疗法是一种潜在的对策,但有效的开发是具有挑战性的.
- 中和取决于表位特异性,而不仅仅是高亲和力.
研究的目的:
- 描述17个抗素抗体 (VHH和IgG mAbs) 的组.
- 确定抗体亲属性,选择性和表位特异性,以中和.
- 为了确定有效的中和和交叉反应的关键表位.
主要方法:
- 表面等离子共振 (SPR) 和生物层干涉计 (BLI) 用于亲和性和选择性分析.
- 基于SPR的表位组合与网络分析.
- 用酵母表面显示进行深度突变扫描以识别表位残留物.
主要成果:
- 鉴定了17种抗氨酸抗体,评估了对氨酸D和E异型以及氨酸聚合素的亲和力.
- SPR和BLI有效地区分了结合亲和力和动力学.
- 在里异形中确定了关键残留物和保存的表位物,与中和功率相关.
结论:
- 抗体亲和性和表位特异性对于有效的氨酸中和至关重要.
- 从SPR和深度突变扫描得到一致的结果验证了表位标识.
- 这些发现为基于抗体的瑞疗法的合理设计提供了洞察力.
