在人血清中量化HIV-1广泛中和抗体PGT121.414.LS的LC-MS/MS方法
Connor E Gould1, Qing Ma2, Raymond Cha2
1Department of Chemistry, Natural Sciences Complex, University at Buffalo, State University of New York, Buffalo, NY 14260-3000, United States; Center for Integrated Global Biomedical Sciences, Department of Pharmacy Practice, School of Pharmacy and Pharmaceutical Sciences, Biomedical Research Building, Main Street Campus, 330 Hayes Rd., University at Buffalo, State University of New York, Buffalo, NY 14214, United States.
在临床试验中,量化血清中的HIV-1广泛中和抗体 (bNAbs) 是至关重要的. 一种经过验证的LC-MS/MS方法准确测量PGT121.414.LS,这是一个有前途的HIV-1治疗抗体.
科学领域:
- 免疫学
- 分析化学
- 药理学
背景情况:
- 在临床试验中,精确量化人体免疫缺陷病毒-1 (HIV-1) 广泛中和抗体 (bNAbs) 是非常重要的.
- 液体染色体-双重质谱 (LC-MS/MS) 正在成为治疗抗体测量的可行替代品.
研究的目的:
- 验证一种针对性的LC-MS/MS方法来定量bNAb PGT 121.414.LS在人体血清中.
- 为PGT 121.414.LS在HIV-1治疗和预防中的药理动力学研究建立可靠的测定方法.
主要方法:
- 使用Orbitrap和三重四极质谱进行非特异性净化,然后进行针对性的LC-MS/MS分析.
- 验证包括线性,可重复性,准确性,矩阵效应,稀释完整性和稳定性评估.
- 使用硫酸沉进行净化,以稳定的同位素标记为内部标准.
主要成果:
- 经过验证的方法显示线性校准曲线为10-500μg/mL,量化下限为10μg/mL.
- 质量控制样本符合ICH M10的接受标准,表明其准确性和可重复性很高.
- 测试显示了最小的转移,微不足道的交叉声响,并评估了矩阵效应,稳定性和稀释完整性.
结论:
- 在预期的治疗度范围内,开发的LC-MS/MS测定精确地量化了人体血清中的PGT121.414.LS.
- 该方法为预防和治疗HIV-1的临床研究中监测PGT121.414.LS水平提供了强大的工具.
- 通过准确的药理动力学评估,验证的试验支持了PGT 121.414LS的临床发展.
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