在Streptococcus thermophilus中使用预先选的强促剂构建和优化尼受控表达载体
Yanxin Ye1, Ruiting Zhao2, Leilei Li1
1School of Life Science and Engineering, Henan University of Urban Construction, Pingdingshan, China.
Frontiers in microbiology
|September 3, 2025
概括
研究人员改善了Streptococcus thermophilus的尼控制基因表达 (NICE) 系统. 通过优化可诱导的表达载体和促进体,它们增强了蛋白质的产生,通过P25促进体实现了最高的表达.
科学领域:
- 微生物学
- 分子生物学
- 生物技术
背景情况:
- 尼控制基因表达 (NICE) 系统对乳球菌的基因表达是有效的.
- 在其他乳酸细菌中增强基因表达系统,如Streptococcus thermophilus,对于生物技术应用至关重要.
研究的目的:
- 在Streptococcus thermophilus ATCC19258中优化NICE系统以增强蛋白质表达.
- 构建和评估用于异质蛋白质生产的诱导式表达载体.
主要方法:
- 使用NICE系统组件构建可诱导表达向量pNZ8148-PnisA-gfp-PnisR-nisR-nisK.
- 将载体电解成热球菌,植物菌和菌.
- 优化尼诱导度和最大蛋白质表达时间.
- 用强大的Streptococcus thermophilus促进体 (P15,P18,P23,P25) 替换原生PnisR促进体.
主要成果:
- 在多个乳酸细菌宿主中,NICE系统成功诱导了蛋白质的产生.
- 对Streptococcus thermophilus的最佳诱导条件为3小时的2500 ng/ mL.
- 使用P25促进体 (pNZ8148-PnisA-gfp-P25-nisR-nisK) 的重组等离子体产生了最高的绿色光蛋白 (GFP) 表达水平.
结论:
- 修改后的NICE系统在各种乳酸细菌中具有广泛的适用性.
- 使用强烈的预先选的促进剂 (P25) 可以显著增强Streptococcus thermophilus中异质蛋白的表达.
- 改进的基于等离子体的NICE系统有可能在Streptococcus thermophilus中产生高效的重组蛋白质.


