一种基于HPLC的甲蓝/甲绿方法,用于精确测量血中的硫化
Hassan Mustafa Arif1, Ming Fu2, Tayebeh Amanpour1
1Department of Biology, York University, Toronto, ON, M3J 1P3, Canada.
Biochemical and biophysical research communications
|September 3, 2025
概括
使用甲蓝和甲绿 (MBMG) 的基于HPLC的新方法提供了敏感和可重复的血硫化物 (H2S) 量化. 这种技术克服了测量这种重要气体传递物的挑战,改善了它在健康和疾病方面的研究.
科学领域:
- 生物化学
- 分析化学
- 生理学
背景情况:
- 硫化 (H2S) 是一种关键的内源气传递物,参与心血管,神经和代谢功能.
- 由于H2S的挥发性,反应性和容易氧化性,因此很难准确地测量循环中的H2S.
研究的目的:
- 开发和验证一种敏感,可复制和兼容的血H2S量化方法.
- 为各种研究环境建立可靠的H2S测量平台.
主要方法:
- 开发基于高性能液体染色学 (HPLC) 的甲蓝方法,将甲绿作为内部参考 (MBMG).
- 建立从0.05到10μM的硫化物 (NaHS) 的线性标准曲线.
- 方法灵敏度,可重复性,特异性和样本稳定性的评估.
主要成果:
- 通过MBMG方法证明了线性,并成功量化了野生型 (WT) 和CSE淘汰 (KO) 小鼠之间的显著不同血H2S水平.
- 特异性测试显示其他硫种的干扰很小,只有超生理的囊水平引起了微不足道的信号.
- 反应后的样本在-80°C下至少保持了6个月的稳定性,使得长期储存和远程分析成为可能.
结论:
- 该方法提供了可靠的血H2S量化的实用和敏感方法.
- 这种经过验证的方法适用于研究H2S生理和病理生理的基础,转化和临床研究.
