一种针对VEGF的合成人造驼单域抗体在体外表现出抗血管性作用

科学领域:

• 生物技术
• 免疫学
• 分子生物学

背景情况:

• 血管内皮生长因子 (VEGF) 在癌症和视网膜疾病等疾病中至关重要.
• 20多年来,VEGF一直是重要的治疗点.
• 针对VEGF提供了治疗血管生成相关病理的潜力.

研究的目的:

• 隔离和表征一种针对VEGF的新型,合成,亲和成熟的单域抗体片段 (VHH).
• 增强已知VHH (NbBCII10_FGLA) 对VEGF的亲和力.
• 评估工程VHH的治疗潜力用于抗血管性应用.

主要方法:

• 构建具有多样化的CDR区域 (CDR3,CDR1,CDR2) 的菌体显示库.
• 通过对VEGF异形121进行三轮生物选以向VEGF的VHH.
• 使用亲和度测试,分子建模,ELISA和体外血管生成模型对选定的VHH (NbH1) 进行表征.

主要成果:

• 与原始VHH相比,合成VHH对人类VEGF的亲和力增加了四倍.
• 显示NbH1的可溶性和热稳定性得到维持.
• NbH1有效地破坏了VEGF与VEGFR2和贝瓦西祖马布的相互作用,抑制了VEGFR2的酸化,并减少了内皮细胞的发芽.
• NbH1表现出跨物种活性,并没有干扰VEGFR1结合.

结论:

• NbH1是一种强效的,高亲和度的VHH抑制剂.
• 在治疗病理性血管生成方面,设计的VHH具有显著的前景.
• NbH1代表了一种用于对抗VEGF介导疾病的新型分子工具.