一个基于GFP补充的双表达系统,用于评估活体多索菲拉翅膀形象性盘中的细胞介导的细胞间接触
Mathieu Joseph1, David R Hipfner2
1Institut de recherches cliniques de Montréal (IRCM); Programmes de biologie moléculaire, Université de Montréal.
Journal of visualized experiments : JoVE
|September 8, 2025
概括
研究人员开发了一种新的方法来量化Drosophila翅膀形象性盘中的细胞间接细胞接触. 这种技术使用了分裂GFP系统来可视化和测量不同上皮层之间的信号 filopodia 相互作用.
科学领域:
- 发展生物学 发展生物学
- 细胞生物学 细胞生物学
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 胚胎组织的发育依赖于局部细胞对细胞的信号传递.
- 细胞膜是专门的 filopodia 促进细胞之间的信号交换.
- 了解细胞膜功能对于破译发育模式至关重要.
研究的目的:
- 提出一个用于量化Drosophila翅膀盘上皮细胞之间的细胞因子介导接触的协议.
- 为了能够研究影响细胞膜形成和功能的因素.
- 为了可视化跨光盘的信号 filopodia 相互作用.
主要方法:
- 在活的Drosophila翅膀影像盘中使用了分裂GFP复合试验.
- 使用GAL4-UAS和LexA-LexAop系统来表达互补的GFP片段.
- 使用对焦显微镜对活翼盘制剂进行量化复制的GFP光.
主要成果:
- 成功量化了磁盘本身 (DP) 和周围膜 (PerM) 表皮之间的细胞接触.
- 建立了一种实时成像和量化信号的系统 filopodia.
- 证明了在特定细胞群体中操纵基因表达的能力,以评估细胞接触的影响.
结论:
- 开发的GFP复制协议为研究细胞因子介导的细胞相互作用提供了一个强大的方法.
- 该系统有助于识别细胞系形成和功能的分子调节剂.
- 适应性协议可以应用于其他组织和发育背景.
