视觉化NEK9在行动:基于aptamer的光探针用于实时活细胞成像
Liyu Zhang1, Ying Yang1, Lidangzhi Mo1
1Shaanxi Institute for Pediatric Diseases, Xi'an Children's Hospital, Xi'an, China.
Nucleosides, nucleotides & nucleic acids
|September 10, 2025
概括
研究人员开发了一种新的基于aptamer的光探针,用于对NEK9激酶的活细胞成像. 这种工具克服了传统方法的局限性,使NEK9动态能够清晰可视化,细胞毒性最小.
科学领域:
- 分子生物学分子生物学
- 生物化学 生物化学
- 细胞生物学 细胞生物学
背景情况:
- 活细胞成像对于理解生物研究和医学中的蛋白质动力学至关重要.
- 传统的标签技术面临着诸如探针透性和细胞毒性差等挑战,阻碍了有效的活细胞成像.
研究的目的:
- 开发和验证一种基于aptamer的新型光探针,用于实时成像活细胞中的NEK9激酶.
- 克服现有的活细胞成像方法的局限性.
主要方法:
- 通过采用in vitro捕获-SELEX.识别了一种选择性地结合NEK9的DNA吸收体 (Apt-011),该吸收体使用in vitro捕获-SELEX.
- 设计了一种基于aptamer的'信号启动'光探针,利用aptamer诱导的形状变化来分离光灭器对.
- 验证了探头在活细胞成像中的性能,评估了NEK9可视化和细胞毒性.
主要成果:
- 成功识别了Apt-011,一种具有高特异性NEK9.9的DNA吸收体.
- 开发了一种基于aptamer的光探测平台,用于NEK9成像.
- 在活细胞中成功可视化细胞内NEK9,细胞毒性最小 (细胞活力>95%).
结论:
- 开发的以aptamer为基础的光探针为研究NEK9激酶及其相关信号通路提供了强大的工具.
- 这项工作建立了一个可概括的策略,通过合理的aptamer工程来克服活细胞成像中的关键瓶.


