从单个小鼠B细胞中快速生成抗原特异单克隆抗体
Xuanxiu Ren1, Yiwei Zhang1, Gan Zhang1
1State Key Laboratory of Virology and Biosafety, College of Life Sciences, Wuhan University, Wuhan 430072, China.
Biophysics reports
|September 11, 2025
概括
这项研究优化了一种用于从单抗原特异性小鼠B细胞中测序和克隆抗体基因的协议. 这种精细的方法增强了单克隆抗体的产生和功能查,以更快地发现.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 分子生物学分子生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 从抗原特异性B细胞中识别免疫球蛋白 (Ig) 基因对于理解免疫反应至关重要.
- 开发单克隆抗体需要有效的基因识别和表达方法.
- 现有的单B细胞基于PCR的小鼠抗体开发面临实际挑战.
研究的目的:
- 提出一种优化的协议,用于测序和克隆来自单抗原特异性小鼠B细胞的抗体变量区域.
- 为了实现高通量抗体表达和表征.
- 通过实验室洞察和故障排除来完善现有技术,以有效发现抗体.
主要方法:
- 光激活细胞分类 (FACS) 和逆转录聚合酶链反应 (RT-PCR) 的整合.
- 来自单个B细胞的免疫球蛋白重链和轻链基因的放大.
- 使用12井格式进行抗体表达和功能查.
主要成果:
- 一个优化的协议,用于测序和克隆来自单抗原特异性小鼠B细胞的抗体变量区域.
- 证明了高通量抗体表达和特征能力.
- 能够有效地产生单克隆抗体和功能查.
结论:
- 这种精细的方法加速了抗体发现工作流程.
- 该协议促进了有效的单克隆抗体生产,用于诊断和治疗应用.
- 该方法建立在现有技术的基础上,为更广泛的实验用途提供实用实验室改进.


