在CRISPR编辑的Emery-Dreifuss肌肉缩纤维细胞中减少了Profibrotic分子

科学领域:

• 遗传学和分子生物学
• 细胞生物学 细胞生物学
• 生物化学 生物化学

背景情况:

• 埃梅里-德莱法斯肌肉发育不良 (EDMD) 是一种遗传性疾病,由EMD和LMNA等基因的突变引起.
• EDMD的特点是关节收缩,肌肉消耗和心脏问题,有纤维化和改变的信号通路.
• 之前的研究表明EDMD模型和患者血清中纤维素分子 (TGFbeta2,CTGF) 的升高.

研究的目的:

• 研究EDMD肌肉纤维化背后的细胞机制.
• 探索微RNAs (miRNAs) 在EDMD病变发生中的作用.
• 评估EDMD的基因校正疗法的潜力.

主要方法:

• 分析患者衍生的纤维细胞和肌细胞培养物,其EMD,LMNA或SYNE的突变2.
• 量化阿尔法平滑肌动蛋白阳性肌纤维细胞和益菌性miRNA-21表达的量化.
• 在EDMD1和EDMD2纤维细胞中进行CRISPR/Cas基因校正.
• 在肌细胞中评估纤维化分子和肌肉特异性miRNAs (miRNA-133b,miRNA-206).

主要成果:

• 来自EDMD患者的纤维细胞显示了肌纤维细胞的增加和上调的miRNA-21.
• 克里斯普尔/卡斯校正减少了纤维细胞中的纤维素分子表达.
• 肌细胞表现出下调的miRNA-21-5p,miRNA-133b和miRNA-206,以及改变的VEGF调节.
• EDMD1同源细胞证明了疾病特异性miRNA特征的救援.

结论:

• 纤维细胞转化为益纤维细胞的表型转化有助于EDMD肌肉纤维化.
• 包括VEGF调节在内的miRNA-206依赖的肌细胞功能缺陷,加剧EDMD的肌肉细胞恶化.
• 基因校正是EDMD1和EDMD2的可行原则证明,同源细胞作为有价值的研究模型.