通过输卵管核酸传递改进的基因组编辑 基于对淘汰赛小鼠生成的In Vivo电技术
Elena I Leonova1, Angelina V Chirinskaite2, Ilyas I Akhmarov2
1Center of Transgenesis and Genome Editing, St. Petersburg State University; e.leonova@spbu.ru.
Journal of visualized experiments : JoVE
|September 15, 2025
概括
通过卵管核酸输送 (I-GONAD) 改进的基因组编辑简化了创建淘汰赛小鼠的过程. 这种新的方法采用了体内电解,减少了动物的使用,与传统技术相比提高了效率.
科学领域:
- 遗传学 是一个遗传学.
- 分子生物学分子生物学
- 发展生物学 发展生物学
背景情况:
- 传统的淘汰赛小鼠生成涉及多个动物密集型步骤:胚胎采集,活体微注射和外科移植.
- 现有的方法面临挑战,包括动物数量高,针塞,以及微注射期间潜在的胚胎死亡率.
- 需要更高效和更容易获得的技术来创建转基因小鼠模型.
研究的目的:
- 通过卵巢核酸输送 (I-GONAD) 方法进行改进基因组编辑的详细协议.
- 为生成淘汰赛小鼠提供简化,单步替代方案.
- 突出I-GONAD相对于传统的淘汰赛生成策略的优势.
主要方法:
- 在I-GONAD技术中使用先进的电阻器 (例如Nepal21) 进行体内基因编辑.
- 在CRISPR-Cas组件 (Cas9蛋白和指导RNA) 中,微小注射到怀孕小鼠的卵管中 (怀孕后0.7天).
- 在体内电穿孔将遗传物质直接输送到卵管内的卵巢中,从而使向基因敲除.
主要成果:
- I-GONAD程序允许在单个步骤中生成淘汰小鼠.
- 这种方法绕过了ex vivo胚胎操纵和手术移植的需要.
- 根据I-GONAD协议,成功生成具有向基因淘汰的幼.
结论:
- I-GONAD提供了一种更有效,更易于使用的方法来创建淘汰赛小鼠.
- 该技术减少了所需的动物数量,并克服了传统方法的局限性.
- 该协议为寻求生成转基因小鼠模型的研究人员提供了宝贵的工具.
