用稳定同位素内部标准对干燥的等离子斑点进行多组学分析,用于生物标志物发现
Wenqian Li1, John R Koethe2,3, Curtis L Gabriel4
1Department of Chemistry, University of Florida, Gainesville, Florida 32610, United States.
Analytical chemistry
|September 17, 2025
概括
一种针对干血斑点 (DBS) 的新型多组学方法使用稳定同位素内部标准 (SIIS) 进行准确的量化. 这种方法可以从小样本中对代谢物和脂质进行可靠的分析,从而推进临床研究.
科学领域:
- 生物化学 生化学
- 分析化学 分析化学
- 临床诊断 临床诊断 临床诊断
背景情况:
- 干血斑 (DBS) 在生物样本采集和储存方面具有优势.
- 微采样技术在准确量化和规范化方面面临着挑战.
- 多组学分析需要强大的方法来进行全面的分子分析.
研究的目的:
- 开发和验证一个全面的分析策略,用于DBS的多态分析.
- 为了提高DBS分析的量化准确性,使用预设的稳定同位素内部标准 (SIIS).
- 为了从最小的样本体积中同时分析代谢物和脂质.
主要方法:
- 开发了一种针对干燥等离子体斑点的优化Folch提取协议.
- 使用高分辨率质谱 (Thermo Q Exactive Orbitrap) 与UHPLC (Dionex Ultimate 3000) 结合使用.
- 将SIIS直接集成到DBS矩阵中,以实现可靠的规范化和提高提取效率.
主要成果:
- 成功地整合了代谢物和脂质的同时分析,实现了广泛的分子覆盖.
- 在艾滋病毒感染者队列中证明了方法的适用性,在糖尿病人和非糖尿病人之间确定了不同的分子配置文件.
- 从微升范围的样本体积中识别了数百种代谢物和数千种脂质.
结论:
- 开发的分析策略为定量DBS多经济学分析提供了一个强大的平台.
- 这种方法克服了微采样中的关键分析挑战,提供了更好的提取效率和规范化.
- 这种方法对于大规模的临床研究和资源有限的环境特别有价值,利用DBS的优势,如简化收集和增强稳定性.
