来自骨髓的巨细胞的超离心法隔离和表征细胞外囊泡的协议

科学领域:

• 细胞生物学 细胞生物学
• 生物化学 生化学
• 免疫学 免疫学 免疫学

背景情况:

• 细胞外囊泡 (EVs) 是细胞间通信的关键媒介,在细胞之间传递分子载荷.
• 巨细胞表现出不同的表型 (例如,M1,M2),影响受体细胞的行为.
• 了解EV的含量和功能需要可靠的隔离方法从特定的细胞类型.

研究的目的:

• 建立一个直接的协议,从骨髓衍生的巨细胞中分离细胞外囊泡 (EVs).
• 在EV隔离之前提供培养和偏振BMDM的详细步骤.
• 概述孤立电动汽车综合性特征的方法.

主要方法:

• 骨髓衍生的巨细胞 (BMDMs) 被培养和极化.
• 细胞外囊泡 (EVs) 被用超离心法从BMDM中分离出来.
• 电动汽车通过传输电子显微镜 (TEM),西部涂抹和纳米粒子跟踪分析 (NTA) 进行了表征.

主要成果:

• 成功开发了一种可复制的协议,用于直接从BMDM中隔离EV.
• 鉴定证实了孤立的EVs的存在和形态.
• 分析提供了关于巨细胞衍生的EVs的大小和分子标记的见解.

结论:

• 这一协议使得从巨细胞群中有效地隔离和表征EVs.
• 该方法支持进一步研究通过EVs的巨细胞间介导细胞间通信.
• 这种技术对免疫学,细胞生物学和再生医学的研究有价值.