通过使用 luciferin-luciferase 技术在炎症酶激活时从巨细胞中量化细胞外和细胞内 ATP 的协议
Julieta Schachter1, Adriana Guijarro2, Pablo J Schwarzbaum1
1Department of Biological Chemistry and Institute of Biochemistry and Biophysics (IQUIFIB), School of Pharmacy and Biochemistry, University of Buenos Aires, Buenos Aires, Argentina.
STAR protocols
|September 20, 2025
概括
这项研究详细介绍了一种在炎性酶激活过程中测量巨细胞中的细胞外和细胞内ATP的方法. 该协议量化ATP水平和水解,有助于细胞死亡研究.
科学领域:
- 细胞生物学 细胞生物学
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 生物化学 生物化学
背景情况:
- 细胞外ATP (腺三酸盐) 影响细胞功能.
- 细胞内ATP耗尽与被编程细胞死亡有关.
- 炎症酶激活是一个关键的免疫路径.
研究的目的:
- 提出一种量化细胞外和细胞内ATP的协议.
- 为了在巨细胞中炎症酶激活期间实现实时ATP测量.
- 提供一种适用于各种细胞类型的方法.
主要方法:
- 骨髓衍生的巨细胞的隔离和分化.
- 诱导炎症酶激活的诱导.
- 使用 luciferin-luciferase 试验量化细胞外和细胞内ATP.
- 实时ATP测量. 在实时ATP测量.
主要成果:
- 成功量化细胞内ATP水平.
- 测量细胞外ATP水解.
- 证明该协议对不同细胞类型的适用性.
结论:
- 开发的协议允许精确测量ATP动态.
- 这种方法对于研究炎症酶激活和细胞死亡有价值.
- 该协议为细胞ATP分析提供了一种多功能工具.
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