开发一种四重qPCR试验,同时检测四种常见的牛病原体
Fuxing Hao1, Chunhao Tao2, Ying Huang2
1Jiangsu Agri-animal Husbandry Vocational College, Taizhou 225300, China.
Journal of virological methods
|September 20, 2025
概括
一种新的多重实时PCR测定有效检测牛疹病毒4 (BoHV4),牛短暂发烧病毒 (BEFV),牛罗塔病毒 (BRV) 和牛中Clostridium perfringens (CP). 这种工具有助于快速诊断和控制共感染,改善群体健康.
科学领域:
- 兽医微生物学 兽医微生物学
- 分子诊断学 分子诊断
- 动物健康 动物健康
背景情况:
- 牛的传染病造成了巨大的经济损失,并影响了牛的健康.
- 与诸如牛疹病毒4 (BoHV4),牛短暂发烧病毒 (BEFV),牛罗塔病毒 (BRV) 和虫 (CP) 等病原体的同时感染使疾病管理复杂化.
- 同时检测多种牛病原体对于有效的监测和控制至关重要.
研究的目的:
- 开发和验证一阶段多重实时PCR (qPCR) 试验,用于同时检测BoHV4,BEFV,BRV和CP.
- 评估开发的多重qPCR试验的分析性能和临床适用性.
- 评估这些四种病原体的流行率及其在牛群中的共感染.
主要方法:
- 开发基于TaqMan的多重qPCR试验,使用四个特定的原始探针组.
- 优化初级探头度和回火温度.
- 分析验证包括特异性,敏感性 (检测极限) 和可重复性测试.
- 测试的应用,以选来自牛场的1012个临床样本.
主要成果:
- 多重qPCR试验显示高特异性,没有对其他牛病原体的交叉反应.
- 对所有四种目标病原体 (BoHV4,BEFV,BRV,CP) 的检测极限低至5副本/μL.
- 可重复性测试显示变化系数 (CVs) 低于2.26%.
- 对1012个样本的查显示,至少一个病原体的阳性率为5.24%,其中BRV (3.66%) 和CP (1.28%) 是最常见的.
- 在0.70%的样本中检测到并发感染.
结论:
- 成功开发了一种快速,可靠和具有成本效益的多重qPCR测定方法,用于同时检测四种常见的牛病原体.
- 该试验具有高度灵敏和特异性,适合用于牛传染病监测和控制.
- 这种工具可以快速识别单一和混合感染,支持牛场有效的疾病管理策略.
