优化小鼠卵细胞的玻璃化通过微封装在藻酸盐水凝中

科学领域:

• 生殖生物学 生殖生物学
• 生物材料科学 生物材料科学
• 微流体学 微流体学

背景情况:

• 玻璃化优于缓慢冷以冷保存卵细胞,但需要高度的冷保护剂 (CPA).
• 高CPA度和多步洗增加了透冲击风险,可能会损害卵细胞的发育.

研究的目的:

• 开发一种使用微流体的水凝封装策略,以提高卵细胞玻璃化结果.
• 为了减轻与高CPA度和卵细胞冷保存期间的透性损伤相关的风险.

主要方法:

• 通过微流体系统制备带有卵细胞的三种尺寸 (156-262微米) 的甲基酸盐水凝微球 (OHM).
• 系统评估颗粒大小,玻璃化溶液,CPA加载时间 (4-12分钟) 和卵细胞玻璃化加热程序.

主要成果:

• 通过262μm OHM,VS3溶液,8分钟的加载和两步加热获得最佳结果:91.98%的存活率,75.84%的裂变率,23.86%的胚胎囊率.
• 生存率与Cryotop方法 (91.81%) 相当,但切割率和胚胎囊率显著更高.
• 与Cryotop方法 (0.4396) 相比,OHM表现出最小的卵细胞体积变化 (0.8739) ,表明透损伤减少.

结论:

• 微流体水凝微囊技术为卵细胞玻璃化提供了比 Cryotop 载体方法更好的替代方案.
• 这种方法有效地降低了CPA度,缩短了加载时间,并最大限度地减少了透性损伤.
• 该战略显示出对生育能力的保护和对其他生物样本的潜在应用的希望.