为孕激素生物传感器人工转录因子的结构导向设计

科学领域:

• 合成生物学 合成生物学
• 分子生物学分子生物学
• 生物技术是生物技术.

背景情况:

• 转录因子 (TF) 在合成生物学中对基因调节至关重要.
• 细胞TFs很少在 prokaryotic 系统中用于基因控制.
• 开发用于 prokaryotic 系统的新型 TF 对于推进合成生物学至关重要.

研究的目的:

• 设计和建造一个对孕激素有反应的人工TF.
• 创建一个全细胞生物传感器来检测孕激素在E. 大肠杆菌.
• 为潜在的临床应用优化生物传感器的性能.

主要方法:

• 使用MD模拟设计的人工TF ProB,包括QF_DBD,联结域,链接器和QF_AD.
• 在E中,ProB调节了一种合成促进剂QT控制GFP表达. 大肠杆菌.
• 用于生物传感器优化的细菌丰富策略.

主要成果:

• ProB TF成功控制了E.E.中的基因转录. 大肠杆菌.
• 全细胞孕激素生物传感器表现出高灵敏度 (LOD 0.15 μg/L,EC₅₀ 26.58 μg/L).
• 优化的生物传感器在工作范围 (0.15-40μg/L) 和首选温度 (20-30°C) 中显示了快速检测 (56.4分钟).

结论:

• 人工TF和孕激素生物传感器已经成功地开发出用于 prokaryotic 系统.
• 设计的生物传感器符合孕激素检测的临床应用要求.
• 这项研究为设计 prokaryotes 中的非自然 TF 和人工基因电路提供了宝贵的见解.