在使用百科病毒/昆虫细胞系统的池生物反应器中产生类似于寨卡病毒的颗粒

科学领域:

• 病毒学 病毒学
• 生物技术是生物技术.
• 疫苗开发 疫苗开发

背景情况:

• 寨卡病毒 (ZIKV) 仍然是一个公共卫生问题,需要有效的疫苗.
• 病毒样粒子 (VLP) 是一个有前途的疫苗平台.
• 优化VLP上游生产需要了解细胞宿主过程,如生长,新陈代谢和呼吸.

研究的目的:

• 为了研究多重感染 (MOI) 和中等补充对ZIKV VLP生产在baculovirus/Sf9昆虫细胞系统的影响.
• 确定最大限度地提高ZIKV VLP产量和蛋白质表达的最佳条件.

主要方法:

• 使用一种baculovirus/Sf9昆虫细胞系统来产生ZIKV VLP.
• 多种多样的MOI (2,6和10个PFU/细胞).
• 通过Western blot和SDS-PAGE密度计评估了补充胆固醇和白蛋白的介质与未补充介质对细胞生长,基质吸收,代谢物产生和ZIKV包膜蛋白质表达的影响.

主要成果:

• 中等补充剂显著增加了细胞生长率和ZIKV结构蛋白表达.
• 较高的MOI加剧了细胞代谢,增加了基质吸收和代谢物产生.
• 在没有补充的条件下,MOI 6产生的ZIKV包膜蛋白比MOI 2更高.
• 在补充介质的条件下,MOI 2实现了较高的ZIKV包膜蛋白度 (23.504 mg/L),与未补充条件相比.
• 所得到的VLP的平均直径为~60nm,适合用于疫苗应用.

结论:

• MOI和中等成分都是优化ZIKV VLP生产的关键因素.
• 补充的介质增强细胞生长和蛋白质表达,较低的MOI在这种情况下可能更有利.
• 这些发现为针对ZIKV的可扩展和高效的基于VLP的疫苗生产提供了宝贵的见解.