开发一种HILIC-WAX二维液态染色法,用于基于紫外线的反感性寡核酸杂质的定量测定
Xiao Zhou1, Tai Nguyen1, Xiaoqing Kong1
1Pharmaceutical Operations & Technology, Biogen, 225 Binney Street, Cambridge, MA 02142, USA.
Journal of chromatography. A
|September 22, 2025
概括
使用HILIC和WAX分离的新二维液态染色学方法有效地分析反意义寡核酸杂质. 这种基于紫外线的方法提供了准确的量化和检测,符合质量控制的监管标准.
科学领域:
- 分析化学 分析化学
- 药品分析 药品分析
- 橄核酸的化学成分
背景情况:
- 反感性寡核酸 (ASO) 中的与产品相关的杂质,由于结构上的相似性,造成了重大分析挑战.
- 现有的方法,通常依赖于质谱法 (MS),可能缺乏对角性,以进行全面的杂质表征.
研究的目的:
- 开发和验证一种强大的二维液态色谱 (2D-LC) 方法,用于分析和量化ASO中的杂质.
- 建立一个直角色谱分离策略,用于增强的ASO杂质分析.
主要方法:
- 开发了一种2D-LC方法,将第一维的水友互动色谱 (HILIC) 和第二维的弱离子交换色谱 (WAX) 集成在一起.
- 实验设计 (DOE) 用于对染色学参数进行系统的优化.
- 该方法是在选择性综合模式下运行,采用了第一维剂的完整样本.
主要成果:
- 通过HILIC-WAX 2D-LC方法证明了高正交度,根据极性和电荷分离杂质.
- 获得了优异的线性 (R2 > 0.999) 和低量化极限 (0.3-0.6μg/mL或0.3-0.6%).
- 检测限值低至0.1%,满足了杂质分析的监管要求.
结论:
- 完全基于紫外线的2D-LC方法为ASO杂质分析提供了实用和有效的解决方案,而不需要MS检测.
- 该平台适合ASO开发和常规质量控制,为寡核酸特性提供多功能性.
