用普罗米辛标记的新生多的蛋白质组分析

科学领域:

• 蛋白质组学是指蛋白质组学.
• 分子生物学分子生物学
• 生物化学 生化学

背景情况:

• 从核糖体中出现的新生的多和它们的N-终端影响蛋白质的稳定性,折叠,相互作用和细胞定位.
• 了解蛋白质合成的这些早期阶段对于破译细胞机制至关重要.

研究的目的:

• 介绍一种简化协议,用于延长新生多的全蛋白体概况.
• 为了使蛋白质N-终端及其功能影响的详细分析.

主要方法:

• 生物化学丰富的新生聚酸标有普罗米辛的标签.
• 基于质谱的定量蛋白质组学.
• 通过细胞培养中的氨基酸 (SILAC) 进行代谢脉冲标记和稳定同位素标记.
• 免疫沉,分离和N端乙化丰富.

主要成果:

• 详细的,逐步的协议提供了新生的多形状.
• 该协议整合了氨酸标签,SILAC和质谱仪,用于定量分析.
• 在用环胺治疗的HeLa细胞中已证明适用性,适应各种细胞系统和治疗.

结论:

• 本协议提供了一种可靠的方法,用于在全蛋白质组范围内分析新生的多.
• 这种技术有助于研究蛋白质N-终端及其在蛋白质生物发生中的作用.
• 该协议是多功能和适用于不同的细胞培养模型和实验条件.