克里斯普尔/Cas9兼容的等离子体使人类真菌病原体Cryptococcus neoformans的七种主要遗传选择方法成为可能

科学领域:

• 菌类学 菌类学是指菌类学.
• 分子生物学分子生物学
• 遗传学 是一个遗传学.

背景情况:

• 新型菌 (Cryptococcus neoformans) 是导致真菌脑膜炎的主要原因,也是真核生物学的模型.
• 目前的基因操纵依赖于有限的主导标记 (NAT,NEO,HYG,amds).
• 需要额外的选择方法,以促进C. neoformans菌株的多重遗传修饰.

研究的目的:

• 确定和验证C. neoformans.的新兴主导遗传选择方法.
• 扩大用于C. neoformans组合基因操纵的工具包.
• 用新的标记物促进CRISPR/Cas9介导的基因组修饰.

主要方法:

• 识别了抗布拉斯蒂丁S (BSD/BSR) 耐药性作为一种新兴的主导标志物.
• 验证弗莱米辛耐药性 (BLE) 作为主要标志物.
• 将BSD,BSR,BLE和ptxD标记物纳入基于PCR的矢量序列,以构建融合标记物-sgRNA产品.

主要成果:

• 布拉斯蒂辛S耐药性 (BSD/BSR) 已被确立为一种新的主导选择方法.
• 弗莱米辛耐药性 (BLE) 已被验证为一种额外的主导选择方法.
• 这项研究将C. neoformans的可用主导遗传选择方法扩展到七种 (五种药物,两种原性).

结论:

• 扩大的支配性选择标记集增强了C. neoformans作为模型生物的实用性.
• 这些新工具为C. neoformans.中的序列遗传修饰提供了灵活性.
• 开发的载体系列支持高效的CRISPR/Cas9介导的基因组编辑.