二次料过和储存条件影响微量元素的可用性和2000L尺度的工艺性能
Abhinav R Jain1, Juan Sebastian Reyes1, Cuijuan Yuan2
1Bioprocess Development, Technical Operations, Denali Therapeutics, South San Francisco, California, USA.
Biotechnology progress
|September 25, 2025
概括
由于料介质问题,CHO细胞培养的扩大规模可能不一致. 二次过和储存条件导致铜损失,影响细胞培养性能,但通过优化这些过程来解决这些问题.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 生物工艺工程 生物工艺工程
- 细胞培养技术 细胞培养技术
背景情况:
- 在工艺扩大过程中,中国仓鼠卵巢 (CHO) 细胞培养的持续性能对于生物制药制造至关重要.
- 操作参数的微妙变化,例如料介质的处理,可以显著影响细胞培养结果.
- 之前的扩展努力在维持细胞活力和生产率方面遇到了挑战.
研究的目的:
- 调查料介质过和储存在工艺扩大过程中对CHO细胞培养性能的影响.
- 为了确定在2000L尺度上观察到的降低标位和可活细胞密度的根本原因.
- 在扩展过程中建立恢复和保持一致的细胞培养性能的策略.
主要方法:
- 在不同尺度上对CHO细胞培养性能进行比较分析 (基板对比2000L).
- 根源原因分析,包括料介质的微量元素分析.
- 评估料介质的储存条件 (温度) 和过步骤 (二次无菌过).
- 实施工艺修改 (消除二次过,优化储存).
主要成果:
- 在2000L尺度上观察到位的70%降低和峰值可活细胞密度 (VCD) 的25%降低.
- 微量元素分析显示,在2000升尺度下,料介质中的铜 (Cu2+) 损失显著.
- 铜的损失归因于储存期间的沉和通过二次无菌过去除,导致乳酸盐积累增加.
- 优化料介质储存 (2-8°C) 和消除二次过恢复了2000升尺度上的工艺性能.
结论:
- 料介质的过和储存条件极大地影响微量营养素的稳定性和可用性,影响CHO细胞代谢和生产力.
- 二次无菌过,虽然用于微生物控制,但可以无意中改变料成分,并对细胞培养结果产生负面影响.
- 对料介质稳定性,过和储存策略的彻底评估对于确保跨制造规模一致的生物反应器性能至关重要.
