用DNA和烯酸酸共同装载的脂质纳米颗粒的制备和表征
Manthan N Patel1,2, Sachchidanand Tiwari2,3, Jacob S Brenner1,2
1Department of Systems Pharmacology and Translational Therapeutics, Perelman School of Medicine, University of Pennsylvania, Philadelphia, PA, USA.
Bio-protocol
|September 26, 2025
概括
标准的等离子体DNA载入的脂质纳米粒子 (pDNA-LNP) 会引起炎症. 同载油酸 (NOA) 抑制STING,通过NOA-pDNA-LNP实现安全,长期的基因传递.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 基因治疗 基因治疗
- 免疫学 免疫学 免疫学
背景情况:
- 脂质纳米粒子 (LNP) 是有效的核酸载体.
- 带有等离子体DNA的LNP (pDNA-LNP) 通过cGAS-STING通路引发炎症和毒性.
- 这种免疫反应限制了体内应用,并导致小鼠的死亡.
研究的目的:
- 开发一种更安全的方法,用于使用LNP输送等离子体DNA.
- 为了减轻与pDNA-LNP相关的炎症反应.
- 为长期基因传递提供一种生产和表征新型NOA-pDNA-LNP的协议.
主要方法:
- 将等离子体DNA和油酸 (NOA) 同载到LNP中.
- 使用NOA作为内源性STING抑制剂.
- 开发生产和表征NOA-pDNA-LNP的协议,包括DNA和NOA封装效率,粒子大小和质量控制.
主要成果:
- 标准的pDNA-LNP激活cGAS-STING通路,导致严重的免疫反应和死亡率.
- 在体内,NOA-pDNA-LNP有效地减轻了炎症.
- 使用NOA-pDNA-LNPs几个月来实现了安全和持续的基因表达.
结论:
- 将NOA同时加载到pDNA-LNP中是一种可行的策略,以克服STING介导的炎症.
- NOA-pDNA-LNP使得基因传递的安全和长期应用成为可能.
- 本协议促进了这些先进的LNP配方的生产和表征.
