来自人类病原体Neisseriagonorrhoeae的histidinol脱酶的生物化学表征

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 酶学 是一种酶学.
• 微生物学 微生物学

背景情况:

• 伊斯蒂丁醇脱酶 (HisD) 是l-伊斯蒂丁生物合成中的一个关键酶.
• 他的D是一种潜在的抗菌目标,用于诸如Brucella suis和Mycobacterium结核病等病原体.
• 在Neisseria物种中,l-histidine生物合成途径的存在和功能尚未完全理解.

研究的目的:

• 描述Neisseria gonorrhoeae (NgHisD) 的重组HisD的生物化学特性.
• 为了评估NgHisD作为潜在的抗菌点.
• 为了研究海斯提丁生物合成途径在Neisseria物种.

主要方法:

• 再组合的NgHisD表达和净化.
• SDS-PAGE和大小排除色谱用于子单元和寡合状态的确定.
• 在不同的条件下 (pH,温度,金属离子,抑制剂) 的酶动力学 (活性测定,K_M确定).

主要成果:

• 再组合的NgHisD存在于一个同位体 (∼105 kDa原生大小).
• NgHisD是一种高度选择性的NAD+依赖酶,其特定活性为17.3 ± 0.4 U mg-1.
• 最佳活性是在pH9.5和45°C与Mn2+;酶对1,10-类素敏感,表明金属离子依赖.

结论:

• NgHisD是一种特征很好的同位素,NAD+依赖的酶.
• 这些发现支持NgHisD作为潜在的抗菌点.
• 这项研究揭示了Neisseria cinerea中没有正规的histidine生物合成途径.