一个活细胞生物传感器协议,用于高分辨率查耐治疗癌细胞

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 细胞生物学 细胞生物学
• 癌症研究 癌症研究

背景情况:

• 遗传编码死亡指标 (GEDI) 是一个比度,双光生物传感器.
• 它可以通过流入实时检测细胞死亡.
• 最初用于神经退行症的GEDI适用于癌细胞研究.

研究的目的:

• 详细说明在癌细胞中使用GEDI来量化治疗诱导的死亡的协议.
• 为了使单细胞分辨率跟踪细胞命运.
• 优化GEDI,用于高通量药物和辐射查以及对抗性亚克隆的识别.

主要方法:

• 产生GEDI表达的癌细胞系.
• 使用辐射或化疗实证地确定压力诱导的GEDI值.
• 时间分辨率成像和图像分析用于细胞命运跟踪.

主要成果:

• 该协议提供GEDI比值,单细胞死亡时间注释和形态数据.
• 这个工作流被优化为选异质癌细胞种群.
• 它有助于识别抗化疗和放射性癌症亚克隆.

结论:

• 在癌症中,GEDI提供了一种强大的实时监测治疗诱导的细胞死亡的工具.
• 该协议支持高通量查和药物和辐射耐药性的表征.
• 输出可以与下游分析联系起来,例如转录学和体内验证.