使用双标签的UHPLC-MS/MS方法量化内源性和标志物衍生的体

科学领域:

• 代谢生物化学 代谢生物化学
• 分析化学是一种分析化学.
• 生物标志物的量化和量化.

背景情况:

• 体,乙酸 (AcAc) 和β-基酸 (βOHB),在葡萄糖稀缺期间对能量代谢至关重要.
• 在代谢追踪中量化体需要精确测量标记和未标记的池.
• 目前的UHPLC-MS/MS方法面临C标记标准和AcAc不稳定的局限性.

研究的目的:

• 开发一种新的,稳定的同位素标记的内部标准方法,用于同时量化标记和未标记的体.
• 克服与AcAc不稳定性和在追踪器研究中缺乏合适标准相关的挑战.
• 为了优化UHPLC-MS/MS方法的高通量,准确的体分析.

主要方法:

• 合成的酸乙酸 (d₃-AcAc) 和[3,4,4,4-d₄]βOHB作为内部标准.
• 优化了d₃-AcAc合成的基催化水解,通过H NMR确认纯度.
• 在生物矩阵中验证了d₃-AcAc的稳定性,并将该方法的性能与传统技术进行了比较.

主要成果:

• 为合成的d₃-AcAc.获得了高纯度 (99.2 ± 0.2%).
• 在提取缓冲区和血清中,d₃-AcAc的稳定性至少在5小时内被证明.
• 与传统方法相比,新方法显示出更高的精度,准确性和易用性.

结论:

• 使用d₃-AcAc和[3,4,4,4-d₄]βOHB开发的方法为体量化提供了一个强大的解决方案.
• 这种方法显著提高了体的代谢追踪能力.
• 能够在各种生理和病理状态下快速准确地调查体代谢.