一种快速的LC-MS/MS方法,用于同时量化人体血中10个关键的叶酸循环中间体

科学领域:

• 生物化学 生化学
• 分析化学 分析化学
• 临床诊断 临床诊断 临床诊断

背景情况:

• 叶酸循环对于代谢调节至关重要,其中间体是各种疾病的关键生物标志物.
• 目前的LC-MS/MS方法与极性叶酸代谢产物作斗争,导致分析时间长,保留能力差.
• 准确有效地测量这些代谢物对于临床诊断和疾病管理至关重要.

研究的目的:

• 开发和验证一种新的HILIC-MS/MS方法,用于同时量化人体血中10种关键叶酸循环代谢物.
• 与现有方法相比,改善色谱保留并减少分析运行时间.
• 应用开发的方法来评估重症患者,特别是急性损伤 (AKI) 患者的代谢干扰.

主要方法:

• 开发一种HILIC-LC-MS/MS方法,用于同时测量人体血中的5种叶酸中间体,4种相关氨基酸和维生素B12.
• 方法验证包括线性,精度,回收和矩阵效应评估.
• 应用验证的方法来分析来自AKI患者和健康对照的血样本.

主要成果:

• 新的HILIC-LC-MS/MS方法实现了在8.5分钟内同时测量10种叶酸循环代谢物,而无需衍生.
• 该方法表现出极好的线性 (R2>0.989),可接受的精度 (一天内1.3-11.3%,一天内3.4-14.6%),恢复 (89.5-113.8%),以及矩阵效应 (81.6-115.8%).
• 对临床样本的分析显示,在AKI患者中,5-甲基四酸 (5-MTHF) 和甘氨酸 (Gly) 的水平显著升高,血清肌素 (SCr) 和5-MTHF/同氨酸 (hCys) 水平之间存在正相关性.

结论:

• 开发的HILIC-LC-MS/MS方法提供了一种快速,灵敏和可靠的方法,用于量化人体血中关键的叶酸循环代谢物.
• 这种方法有助于评估叶酸营养状况,并识别与AKI等疾病相关的代谢障碍.
• 这些发现突显了这种试验在减轻与叶酸相关疾病 (如巨细胞贫血和神经管缺陷) 相关的风险方面的潜力.