鉴定和分类抗原特异性B细胞的协议,来自菌感染的小鼠
Carolina Calôba1, Allen M Minns2, Scott E Lindner2
1Discipline of Microbiology and Immunology, Rosalind Franklin University of Medicine and Science, North Chicago, IL, USA; School of Graduate and Postdoctoral Studies, Rosalind Franklin University of Medicine and Science, North Chicago, IL, USA; Center for Cancer Cell Biology, Immunology and Infection, Rosalind Franklin University of Medicine and Science, North Chicago, IL, USA.
这项研究提出了一种使用SpyCage技术在动物中识别疟疾特异性B细胞的协议. 这种方法使下游单细胞测序能够进行详细的免疫反应分析.
科学领域:
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 寄生虫学的寄生虫学
- 分子生物学分子生物学
背景情况:
- 疟疾仍然是一个重大的全球健康挑战,需要详细了解宿主免疫反应.
- 鉴定抗原特异性B细胞对于开发有效的疫苗和疗法至关重要.
- 目前的方法可能缺乏用于全面B细胞分析的特异性或吞吐量.
研究的目的:
- 在动物疟疾模型中建立一种隔离抗原特异性B细胞的协议.
- 为了使这些B细胞的下游多原子单细胞分析.
- 为疟疾免疫学研究提供可复制的方法.
主要方法:
- 开发针对Plasmodium falciparumMSP1-19抗原的SpyCage试剂.
- 来自感染动物的脏单细胞悬浮剂的制备.
- 用于细胞分类的B细胞丰富和光染色.
- 使用流细胞计分离活体,抗原特异性B细胞.
主要成果:
- 成功识别和分离MSP1-19特定的B细胞种群.
- 证明该协议与单细胞RNA测序,V(D) J测序和ATAC测序的兼容性.
- 为下游分子分析生成高质量的数据.
结论:
- 描述的协议为在疟疾研究中分离抗原特异性B细胞提供了强大的方法.
- 这种技术有助于在单细胞水平上深入研究B细胞的反应.
- 该协议可适应研究其他抗原特异性免疫反应.
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