使用质量转移缺陷过的稳定同位素追踪工作流程的修改后的两剂量差异大大减少了非向的尼费迪平代谢物分析中的错误阳性

科学领域:

• 药理学和毒理学 药理学和毒理学
• 分析化学 分析化学
• 生物化学 生物化学

背景情况:

• 不针对性药物代谢物识别面临着平衡全面覆盖与高错误阳性率的挑战.
• 以前的两剂量差异平台与稳定同位素追踪 (SIT) 提供了良好的覆盖率,但具有很高的错误阳性负担.
• 制定减少虚假阳性结果的策略对于可靠的代谢物识别至关重要.

研究的目的:

• 评估和增强数据处理工作流程,用于非向药物代谢物识别.
• 在不影响覆盖范围的情况下降低代谢物检测中的错误阳性率.
• 为了优化两个剂量差异平台与稳定同位素追踪 (SIT) 结合.

主要方法:

• 基准测试四个数据处理工作流程:原始和修改的两剂量差异+SIT,剂量反应+SIT,和质量缺陷过+SIT.
• 使用尼菲迪平 (NIF) 作为探针,并在三个化设置下获取UPLC-MS数据:联合化,单独化和反应后混合.
• 使用有针对性的MS/MS验证来确认已识别的代谢物.

主要成果:

• 经过修改的两剂量差异+SIT工作流程,结合了质量转移缺陷过器,可显著提高NIF代谢物的真正阳性率,从36.9%提高到71.0%.
• 这种修改后的工作流确定了所有65种假定NIF代谢物,包括之前报告的3种,而不会牺牲代谢物覆盖范围.
• 与联合化 (44) 或混合超浮物 (38) 相比,单独的化产生了更全面的代谢物概况 (56个特征).

结论:

• 将质量转移缺陷过器纳入两剂量差异+SIT工作流程,有效地使药物代谢物的真正阳性发现率翻了一番.
• 这种简化,剂量独立的方法减少了假阳性,并加速了可靠的代谢物识别.
• 增强的平台为早期药物代谢研究和机械药理学提供了实用和资源高效的解决方案.