基于NMR和UHPLC-MS的单个血和肝脏组织,优化样品制备以进行代谢和脂质分析,基于NMR和UHPLC-MS

科学领域:

• 生物化学 生物化学
• 分析化学 分析化学
• 代谢学 代谢学 代谢学

背景情况:

• 当前的代谢学研究通常使用单个分析平台 (NMR或MS),限制了全面的分析.
• 分析多个平台需要大量的样本材料,对有限的标本构成挑战.

研究的目的:

• 开发用于序列核磁共振 (NMR) 和多平台液体染色学-质谱学 (LC-MS) 分析的样品保存预处理策略.
• 为了从单个血和肝脏组织样本中实现公正和全面的新陈代谢分析.

主要方法:

• 开发和评估了分别用于血和肝脏的双相 (CHCl3/MeOH/H2O) 和两步 (CHCl3/MeOH,其后是MeOH/H2O) 提取协议.
• 基于NMR的综合代谢与随后的多LC-MS (UHPLC-Q-Orbitrap MS,UHPLC-QqQ MS) 分析.
• 评估了协议的稳定性,并为血和肝脏生成了全面的代谢地图.

主要成果:

• 双相法对血有效,平衡了代谢物覆盖率,可重复性和样本输入,用于极性和脂质提取.
• 建议对肝脏组织采用两步方法,使得顺序性脂组学和非向性极性代谢物分析分析后的NMR分析成为可能.
• 经过验证的协议可以从单个样本进行多平台分析,从而提高代谢分析能力.

结论:

• 介绍了用于血和肝脏多平台代谢的独特,样品保存的制备程序.
• 能够进行全面的代谢分析,以识别各种生理和病理状况的变化.
• 通过综合分析方法,促进对生物系统的更深入的理解.