在水牛中早期检测怀孕,在双重RT-qPCR中准干扰素刺激基因
Paramjeet Sharma1, Navdeep Singh Ratta2, Shanti Choudhary1
1Animal Stem Cells Lab, Department of Bioinformatics, College of Animal Biotechnology, Guru Angad Dev Veterinary and Animal Sciences University, Ludhiana, India.
The Journal of dairy research
|October 15, 2025
概括
一种新的RT-qPCR测定准确地检测了使用ISG15和LGALS3BP基因表达的水牛早期怀孕. 这种方法提高了生殖效率和乳制品生产,提供可靠的结果早在20天后播种.
科学领域:
- 兽医繁殖 兽医繁殖 兽医繁殖
- 分子诊断学 分子诊断
- 乳制品科学 乳制品科学
背景情况:
- 早期怀孕诊断对于优化水牛的生殖效率和乳制品生产至关重要.
- 当前的诊断方法在时间和准确性方面可能存在局限性.
- 确定可靠的生物标志物用于早期怀孕检测是必不可少的.
研究的目的:
- 开发和验证基于TaqMan的双重反转录定量PCR (RT-qPCR) 试验,用于水牛的早期怀孕诊断.
- 利用干扰素刺激基因 (ISG),特别是ISG15和LGALS3BP,作为检测怀孕的分子标记物.
- 评估开发的试验的灵敏度和特异性,以便在实践中应用.
主要方法:
- 在不同时间点 (0,20,25,40天) 从人工受精的水牛收集全血样本.
- 从外围血液单核细胞 (PBMC) 中分离RNA并进行cDNA合成.
- 开发并验证了一种基于TaqMan的双重RT-qPCR试验,针对ISG15和LGALS3BP基因表达.
- 采用超声波测试来确认40天后的怀孕.
主要成果:
- 在怀孕的水牛中观察到ISG15和LGALS3BP的显著不同的转录丰度,在受精后的第20天.
- 在怀孕和非怀孕动物之间检测到ISG15和LGALS3BP转录的统计学上显著的折叠变化 (p <0.05).
- 验证数据集显示了高的诊断准确性,曲线下的面积 (AUC) 值为0.95和0.90,预测值在75%至95%之间.
结论:
- 开发的双重RT-qPCR测定是一种敏感和特定的工具,用于在水牛中早期检测怀孕.
- 该测试可靠地使用ISG15和LGALS3BP生物标志物在精液注射后20天内确定怀孕.
- 这种分子诊断方法具有改善水牛生殖管理和乳制品生产率的巨大潜力.
