使用亲和性净化加上基于三性消化的液体染色学-双重质谱分析来量化活性和总的阿达利木马布
Xiaoran Hou1, Yifei Liu1, Zengxuan Cai2
1Tianjin Medical University General Hospital, No. 154 Anshan Road, Heping District, Tianjin 300070, China; Zhejiang Key Laboratory of Artificial Organs and Computational Medicine, Zhejiang Shuren University, 8, Shuren Street, Hangzhou 310015, China.
Journal of pharmaceutical and biomedical analysis
|October 15, 2025
概括
现在,新的方法可以测量患者的活性和非活性阿达利木马布 (用于治疗自身免疫性疾病的药物). 这提供了比较旧的测试更完整的图片,可能改善治疗指导.
科学领域:
- 药理学和毒理学 药理学和毒理学
- 分析化学 分析化学
- 免疫学 免疫学 免疫学
背景情况:
- 治疗药物监测 (TDM) 的阿达利穆马布对于管理响应的损失至关重要.
- 目前的TDM方法通常仅测量活性阿达利穆马布,可能导致不完整的临床评估.
- 非活性形式的阿达利穆马布可能会影响治疗疗效和患者的治疗结果.
研究的目的:
- 开发和验证一种用于同时量化活性度和总度的新方法.
- 解决现有方法的局限性,这些方法忽视了非活性阿达利穆马布的形式.
- 提供一个更全面的工具,用于治疗药物监测的阿达利姆巴.
主要方法:
- 开发一种液体染色学-双重质谱法 (LC-MS/MS) 方法,并进行亲和性净化.
- 从Fab区域选择一个特定的特征 (APYTF GQGTK) 来进行敏感检测.
- 样品预处理的优化,包括酸性解离和与TNFα的竞争性结合.
- 根据FDA指导方针进行验证,使用同位素标记的内部标准 ([13C9,15N]-APYTF*GQGTK).
主要成果:
- 经过验证的LC-MS/MS方法显示出优异的恢复率 (89.4-111.4%),精度 (CV<9.7%) 和线性 (r2>0.998).
- 对临床样本的分析显示,与现有的免疫试验有很强的相关性 (r=0.929),但显示出系统偏差 (14.1%).
- 活性阿达利木马布与总阿达利木马布的比例差异很大 (53.5%至115.8%),这凸显了测量两种形式的重要性.
结论:
- 开发的LC-MS/MS方法准确量化了活性和总的阿达利穆马布,比目前的方法提供了更完整的评估.
- 观察到的活性与总阿达利穆马布比率的变化表明,这对指导治疗具有潜在的临床意义.
- 该方法强大,适应性强,可扩展到监测其他治疗性单克隆抗体.
