建立基于数字PCR的病毒抗原和核酸检测的通用标准

科学领域:

• 病毒学和诊断测试开发开发
• 分子诊断和免疫试验
• 生物技术和标准化工作

背景情况:

• 病毒抗原快速检测测试 (Ag-RDTs) 和基于PCR的核酸放大测试 (NAATs) 对于诊断SARS-CoV-2等感染至关重要.
• 评估Ag-RDTs的一个关键挑战是缺乏用于病毒抗原量化的标准化单位,与核酸不同.
• 这阻碍了精确的分析评估和Ag-RDT与NAAT的直接比较.

研究的目的:

• 建立SARS-CoV-2抗原和核酸的通用国家标准.
• 为了能够精确分析评估和直接比较Ag-RDTs和NAATs.
• 克服病毒抗原缺乏标准化单位所带来的局限性.

主要方法:

• 通过使用非活化的Omicron BA.1 SARS-CoV-2菌株建立了通用国家标准.
• 通过多实验室数字PCR (dPCR) 和评估的无活化方法 (热与β-propiolactone [BPL]) 分配的度.
• 用Ag-RDTs和NAAT测试临床样本,然后使用标准来评估测试检测极限 (LoDs).

主要成果:

• 通过BPL无活化,比热无活化更好地保持抗原活性,同时保持可比的核酸标位.
• 国家标准度确定为1.04 × 10⁸ 单位/毫升.
• 一般来说,NAAT显示的LoD值低于Ag-RDT,但该标准能够直接进行跨格式的LoD比较和商业测试的验证.

结论:

• 成功建立了针对SARS-CoV-2抗原和核酸的经过验证的BPL-非激活的通用国家标准.
• 这个标准有效地解决了病毒抗原的量化挑战.
• 它有助于在SARS-CoV-2 Ag-RDTs和NAATs之间进行直接的敏感性比较.