下游工作流程用于使用触角流过和AEX膜染色学对静脉病毒载体进行中间净化

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 下游加工 下游加工
• 病毒载体制造业 病毒载体制造业

背景情况:

• 对高纯度的晶状病毒载体 (LVs) 的日益增长的需求需要可扩展和具有成本效益的净化方法.
• 膜色谱,特别是离子交换 (AEX),对于工业生物工艺中LVs的中间净化至关重要.
• 触流过 (TFF) 可以预处理LV收获的度,缓冲区交换和杂质去除.

研究的目的:

• 为了评估TFF与AEX染色体的整合,用于lentiviral载体净化.
• 为了将TFF-AEX工作流与LV中介净化仅AEX的工作流进行比较.
• 评估TFF预处理对AEX性能和整体杂质去除的影响.

主要方法:

• 研究了两个工作流程:仅使用Sartobind Convec D膜的AEX和使用Hydrosart高性能TFF膜的TFF-AEX,其次是AEX.
• 收获和澄清的LV收获通过AEX直接处理或在AEX加载之前通过TFF集中/透过.
• 两个工作流程之间的动态结合能力和杂质去除效率的比较.

主要成果:

• 与只有AEX的工作流相比,TFF-AEX工作流显示出更高的动态绑定能力.
• 采用TFF-AEX方法的结果是从lentiviral载体收获中提升了杂质的清除.
• 使用TFF优化条件用于随后的AEX捕获的预度和缓冲区交换.

结论:

• 在AEX染色学之前整合TFF是一种有效的策略,可以增强lentiviral载体净化.
• 对于工业规模的LV生产,TFF-AEX工作流提供了改进的性能指标,包括结合能力和杂质清除.
• 这种综合方法为lentiviral载体提供了更强大,更有效的下游处理解决方案.