液体覆盖技术生成的3D细胞培养物的形态表征

科学领域:

• 细胞生物学 细胞生物学
• 生物技术是生物技术.
• 显微镜的使用方法

背景情况:

• 三维 (3D) 细胞培养提供了一个比传统的二维培养更具生理相关性的模型.
• 像光显微镜这样的标准分析方法在有效分析3D细胞结构方面面临挑战.
• 了解影响3D球形形成和稳定的因素对于可靠的实验结果至关重要.

研究的目的:

• 研究细胞播种密度,培养时间和固定方法对3D细胞培养物的形态和稳定性的影响.
• 量化随着时间的推移3D细胞培养的大小和形状的变化.
• 为了比较不同固定剂 (甲甲,甲/脱水) 对3D细胞聚合物的结构的影响.

主要方法:

• 使用液体覆盖技术生成3D正常人类皮肤纤维细胞培养物,其细胞密度不同 (10,000200,000细胞).
• 在播种后1,2,3天使用光显微镜,扫描电子显微镜和数字光显微镜 (高度谱) 分析培养物.
• 在不同的固定条件和细胞密度下,量化球形圆度与缩聚合物.

主要成果:

• 随着时间的推移,3D细胞培养体现出尺寸缩小,数学上描述为指数式衰变,归因于细胞收缩和重组.
• 圆形球形与缩聚合物的比例取决于细胞数量,培养年龄和固定方法.
• 较高的细胞密度和化物固定 (甲甲,甲) 减少了圆形球状体的形成,特别是在第一天,这表明了固体阻碍和蛋白质交叉链接效应.

结论:

• 细胞播种密度,化时间和固定协议显著影响液体覆盖技术产生的3D球体的稳定性和形态.
• 化物固定可以诱导结构变化,导致更缩的聚合物,这种效应随着时间的推移而减弱.
• 仔细考虑这些参数对于利用3D细胞培养模型的下游应用中可重现的结果至关重要.