再组合ApoE3冠状加上糖糖玻璃化赋予mRNA-LNP结-解和-80°C的稳定性

科学领域:

• 生物技术是生物技术.
• 材料科学 材料科学 材料科学
• 制药科学 制药科学

背景情况:

• 脂质纳米颗粒 (LNP) 对于mRNA输送至关重要,但在储存过程中容易降解.
• 目前的冷保护剂,如糖,提供不完全的稳定,导致mRNA疫苗的显著活性损失.
• 储存在-80°C,同时减缓RNA水解,可以导致LNP相分离和冰损伤.

研究的目的:

• 开发一种化学定义的双重策略,用于稳定脂质纳米粒子 (LNP) 用于mRNA输送.
• 为了提高mRNA载荷的LNP的长期存储稳定性和结解性.
• 改善mRNA疫苗和基因疗法的实际处理和保质期.

主要方法:

• 预吸附重组阿波利波蛋白E3 (ApoE3) 到LNP以稳定脂质包装.
• 使用10%的糖糖,对周围溶液进行玻璃化.
• 在储存在-80°C和冷-解周期后评估mRNA封装,尺寸均性和露西法酶表达.
• 在C57BL/6小鼠中对LNP输送效率和毒性的体内评估.

主要成果:

• 通过双重策略,在4周的-80°C和三次冷-解周期后,超过90%的mRNA封装,大小均性和光酶表达得到保护.
• 在体内研究显示,与新鲜的LNP相比,肝脏生物发光率增加了约3倍,而IL-6或器官毒性没有增加.
• 在室温下,解后的LNP在72小时内保持了70%以上的功效,大大延长了处理窗口.

结论:

• ApoE3 预吸附和糖糖玻璃化的结合提供了一种稳定的方法来稳定mRNA载荷的LNP.
• 这一策略克服了LNP的脆弱性,使得mRNA疫苗和基因疗法的实际存储和处理成为可能.
• 该方法具有可扩展性,可以与现有制造集成,并避免冷化或来自等离子体的添加剂.