基因编辑洋 (Allium cepa) 植物的高效生产,使用cas9 RNP和短暂表达结构的生物化传递
Cameron L De La Mora1, Michael J Havey1, Patrick J Krysan2
1Department of Plant and Agroecosystem Sciences, University of Wisconsin-Madison, Madison, WI, USA.
Plant cell reports
|October 19, 2025
概括
我们开发了一种用于洋的新CRISPR-Cas9基因编辑协议,使编辑植物在没有稳定转换的情况下能够有效恢复. 这种方法使用过渡基因表达来丰富再生植物中所需的基因编辑.
科学领域:
- 植物生物技术 植物生物技术
- 基因编辑技术的技术
- 提高作物质量 的方法.
背景情况:
- 对洋等作物开发高效的基因编辑方法对于农业进步至关重要.
- 传统的稳定转换方法用于洋基因编辑通常是低效和耗时的.
研究的目的:
- 建立一个使用CRISPR-Cas9.9在洋植物中有效编辑基因的协议.
- 开发一种绕过稳定转化需求的方法,专注于用于丰富的短暂基因表达.
主要方法:
- 利用了CRISPR相关蛋白9 (Cas9) 的核糖核蛋白 (RNP) 复合体和通过生物学轰炸传递的单导向RNA (sgRNA).
- 配送的等离子体用于抗生素耐药性的短暂表达 (素) 和形态调节剂.
- 在不成熟胚胎的再生过程中,采用过渡性菌素选择来丰富基因编辑细胞.
主要成果:
- 成功生成了47个具有编辑AcDMR6等位基因的洋植物,包括同卵性,双卵性,异卵性和嵌合体植物.
- 最有效的策略产生了高达12%的编辑植物,显示出显著的丰富性.
- 在没有过渡选择再生的对照植物中没有检测到编辑.
结论:
- 在洋植物中建立了一种有效基因编辑的新方案,它依赖于短暂的基因表达和RNP传递.
- 这种方法显著提高了基因编辑植物的恢复,避免了漫长的稳定转化过程.
- 描述的策略有可能用于其他重要的作物物种的基因编辑.
