流细胞测量和单细胞分析用于描述产后小鼠早期大脑发育中的微质激活
Marianne Mengus1, Benjamin Boucher2, Roqaya Imane2
1Azrieli Research Center of CHU Sainte-Justine; Pediatric Department, Faculty of Medicine, Université de Montréal; marianne.mengus@umontreal.ca.
Journal of visualized experiments : JoVE
|October 20, 2025
概括
这项研究详细介绍了两种方法,即流细胞计和单细胞RNA测序,用于分析小鼠大脑中的微质细胞. 这些协议使得在早期大脑发育和疾病期间对微质多样性的强有力的调查成为可能.
科学领域:
- 神经科学是一个神经科学.
- 免疫学 免疫学 免疫学
- 基因组学就是基因组学.
背景情况:
- 微质细胞,大脑的免疫细胞,具有不同的功能,受位置和条件的影响.
- 了解微质异质性对于研究大脑发育和神经疾病至关重要.
研究的目的:
- 提出可复制的协议,以隔离和分析小鼠小脑组织中的微质群.
- 为研究发育变化和疾病影响,使微质细胞的转录基因分析成为可能.
主要方法:
- 针对早产后小鼠大脑组织的优化流细胞计协议,包括酶消化和Percoll梯度离心.
- 使用10X Genomics进行单细胞RNA测序,用于对分离的微质细胞进行转录组分析.
- 利用CD45/CD11b隔离,活/死染色,表面标记物概况和随机森林分类来识别性别.
主要成果:
- 建立了一个强大的方法,用于高质量的神经细胞悬浮,适合微质分析.
- 能够识别微质和差异性基因表达模式.
- 对于可复制和可适应的微质研究的验证协议.
结论:
- 这些互补的方法为研究小脑中的微质多样性提供了一个框架.
- 这些协议有助于研究早期大脑发育期间的微质变化以及经过实验性扰动后的变化.
