对实时PCR试验的评估,用于在大脑脊髓液中检测肠道病毒

科学领域:

• 临床微生物学 临床微生物学
• 分子诊断学 分子诊断
• 病毒学 病毒学

背景情况:

• 肠道病毒是无菌性脑膜炎的常见原因,需要准确的诊断来区分从细菌性脑膜炎.
• 聚合酶连锁反应 (PCR) 是检测脑脊液 (CSF) 中的肠道病毒的黄金标准,因为它的灵敏度和速度.
• 由于停止使用Cepheid Xpert EV测定方法,因此产生了替代诊断方法的需求.

研究的目的:

• 优化和评估两个实验室开发的实时PCR试验,使用迪亚索林直接放大盘 (DAD) 和通用盘 (UD) 方法.
• 将这些新测试的性能与已停产的Cepheid Xpert EV测试进行比较,用于在CSF中检测肠道病毒.
• 评估DAD和UD方法的临床实用性,作为Xpert EV测定的替代品.

主要方法:

• 使用Diasorin DAD和UD平台开发了实时PCR测定.
• 八十七个临床CSF标本使用DAD,UD和原始Xpert EV测试进行了测试.
• 测试的性能是基于灵敏度,特异性,阳性和阴性协议以及检测极限来评估的.

主要成果:

• 这三种测定都显示出高特异性,对非肠道病毒病原体有100%的负结果.
• 与Xpert EV和DAD (79.6%) 相比,UD方法显示了最高的积极同意 (86.4%).
• 血液污染影响了DAD测定,但没有影响UD方法,突出了其RNA提取步骤的优势.

结论:

• 迪亚索林DAD和UD实时PCR测定是有效和可行的替代方案,用于快速检测CSF中的肠道病毒.
• 这些测试可以帮助填补Cepheid Xpert EV测试的停止所造成的诊断缺口.
• 建议进一步验证这些替代诊断方法的更广泛的临床实施.