在和树中使用正负选择标记物进行无转基因基因组编辑

科学领域:

• 植物生物技术 植物生物技术
• 基因组编辑 基因组编辑
• 分子生物学分子生物学

背景情况:

• CRISPR-Cas基因组编辑在植物中很普遍,但通常会导致转基因后代.
• 产生无转基因编辑植物对于遗传研究,育种和监管方便至关重要,特别是在诸如类和类的多年生植物中.
• 在植物繁殖或多年生植物中生产无转基因编辑植物时,现有的方法面临着挑战.

研究的目的:

• 开发和评估一种共同编辑策略,用于生成无转基因基因组编辑的类和类植物.
• 利用高效的细胞因子基编辑器 (CBE) 来同时编辑目标基因和针对除草剂耐药性的ALS基因.
• 调查转基因短暂表达和潜在的移动RNA运动对于无转基因编辑的有效性.

主要方法:

• 使用细胞酶基编辑器 (CBE) 采用联合编辑策略,以准抗除草剂耐药性ALS基因.
• 过渡性转基因表达在类和树中得到了利用.
• 细胞毒素系统 (FCY-UPP) 用于在5-化素 (5-FC) 介质上对非转基因植物进行负选择.

主要成果:

• 基于CBE的联合编辑策略在类和类中都取得了成功,尽管双联编辑效率很低.
• 编辑效率在树中比树更高.
• 在转基因和非转基因植物中,包含移动RNA序列意外降低了基因组编辑效率.

结论:

• 在果和树中实现了无转基因基因组编辑,通过使用细胞因子基因编辑器的短暂表达来共同编辑ALS基因.
• 开发的战略提出了一种可行的,尽管效率低的方法,用于在具有挑战性的物种中产生无转基因基因编辑植物.
• 需要进一步优化,但这种方法显示了在植物中推进无转基因基因组编辑的前景.