一种优化的点击化学方法允许可视化小鼠大脑中扩散的神经元前代的可视化
Fei Zhao1, Tomonari Hamaguchi1, Ryo Egawa2
1Division of Neurogenetics, Center for Neurological Diseases and Cancer, Nagoya University Graduate School of Medicine, Nagoya, Japan.
Cell reports methods
|October 22, 2025
概括
我们开发了一种3D组织清除和点击化学工作流程 (C4-3D),以可视化细胞增殖标记物,如整个小鼠大脑中的5-乙-2--脱氧氨 (EdU). 这种方法揭示了细胞生成和迁移如何随着衰老和疾病而改变.
科学领域:
- 神经科学是一个神经科学.
- 细胞生物学 细胞生物学
- 生物技术是生物技术.
背景情况:
- 在3D中可视化细胞增殖对于理解发育和疾病至关重要.
- 现有的3D细胞增殖分析方法在分辨率和兼容性方面存在局限性.
研究的目的:
- 建立一个新的工作流程,C4-3D,用于在被清除的整个小鼠大脑组织中可视化5-乙烯-2--脱氧氨 (EdU).
- 研究老化小鼠大脑和疾病模型中增殖神经元原始体的时空动态.
主要方法:
- 开发了一种基于点击反应的工作流 (组织清理与3D,C4-3D的点击化学相结合).
- 通过CUBIC,iDisco+和PACT方法清除的C4-3D应用于整个小鼠大脑组织.
- 利用机器学习进行EDU正核识别和艾伦大脑图谱正常化.
主要成果:
- C4-3D与免疫染色,核染色和光记者小鼠兼容.
- 增殖的神经元原始体在腹腔下区域丰富,并随着年龄的增长而减少.
- C4-3D成功应用于脑梗塞,质母细胞瘤和转移性脑瘤的小鼠模型,以及其他器官和胚胎.
结论:
- 通过C4-3D,可以全面探索3D细胞增殖概况.
- 这种技术有助于研究细胞生成,迁移和分化在发育,疾病和组织修复过程中.
