使用菌体显示的pH依赖抗体对抗瘤相关抗原AXL的生成

科学领域:

• 免疫学 免疫学 免疫学
• 生物技术是生物技术.
• 在瘤学瘤学.

背景情况:

• 与瘤相关的抗原在癌症中表达过度,但在健康组织中也存在,导致治疗性抗体对瘤的毒性.
• 瘤微环境通常是酸性的,这为利用pH差异提供了针对性治疗的机会.

研究的目的:

• 开发pH依赖的抗体,专门针对与瘤相关的抗原.
• 调查pH敏感性是否可以增强抗体瘤特异性并减少瘤以外的副作用.
• 创建一个依赖pH的抗体生成的概念证明,使用氨酸激酶受体AXL作为目标.

主要方法:

• 使用了带有单链可变片段 (scFv) 库的菌体显示器,仅在酸性pH条件下进行泛化.
• 选择并重新格式化了有希望的pH敏感scFvs,将其转化为免疫球蛋白G (IgG) 格式,以便进一步评估.
• 采用分子对接和氨酸扫描来识别涉及pH依赖结合的关键氨基酸残留物.

主要成果:

• 鉴定了9个scFvs,在酸性pH下与AXL结合,在中性pH下结合最小,经过三轮泛化.
• 选择了两种IgG克隆,表现出强烈的pH敏感结合到AXL.
• 确定这些抗体的结合严重依赖于AXL受体上的两个histidine残留物 (61和116位).

结论:

• 建立了一种简单的方法来产生pH依赖的抗体.
• 证明了依赖pH的抗体在改善瘤特异性结合的潜力.
• 表明这种策略可以显著降低基于抗体的癌症疗法在健康组织中的毒性.