抗微生物AMP-PD的复合表达作为协同八合体及其在体外抗菌活性
Xingmiao Lu1, Yuan Sun1, Ziyi Wang1
1Key Laboratory of Industrial Fermentation Microbiology, Ministry of Education, Tianjin, 300457, PR China; Tianjin Key Laboratory of Industrial Microbiology, Tianjin, 300457, PR China; College of Biotechnology, Tianjin University of Science and Technology, Tianjin, 300457, PR China.
一个新的表达系统增强了大肠杆菌的抗微生物 (AMP) 生产,产生32 mg/L的融合蛋白. 这一突破促进了AMP的工业规模生物合成,用于打击抗生素耐药性.
科学领域:
- 生物技术是生物技术.
- 分子生物学分子生物学
- 微生物学 微生物学
背景情况:
- 抗生素耐药性是一个主要的公共卫生威胁.
- 由于耐药性较低,抗菌 (AMP) 显示出作为替代品的希望.
- 低异质表达效率限制了AMP的应用.
研究的目的:
- 开发一种用于AMPs的新型并联基因复制表达系统.
- 优化表达条件以提高复合蛋白产量.
- 评估表达的AMP的抗菌活性.
主要方法:
- 构建了一个重组等离子体 (His6-AMP-PD8) 与串联OM19R重复.
- 在大肠杆菌中实现了聚变蛋白的可溶性表达BL21(DE3).
- 优化诱导温度,时间和IPTG度.
主要成果:
- 在最佳条件下获得32 mg/L的融合蛋白 (35°C,0.7 mM IPTG,10小时的诱导).
- 在切割和超过后分离了16 mg/L的AMP-PD.
- AMP-PD对大肠杆菌具有显著的抗菌活性 (MIC: 45.75 μg/mL,MBC: 62.53 μg/mL).
结论:
- 成功建立了AMP-PD的可溶性表达系统.
- 开发的系统为工业AMP生产奠定了基础.
- 这有利于AMP在抗击细菌感染方面得到更广泛的应用.
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